LIGHTNING 实时单细胞免疫学研究系统

一直以来，肿瘤免疫治疗致力于如何克服肿瘤免疫逃逸机制，重新唤醒免疫细胞来清除 癌细胞，其中如何帮助 T 细胞克服肿瘤诱导的免疫抑制并实现活化是治疗研究的关键， Berkeley Lights公司开发的LIGHTNING实时单细胞免疫学研究系统针对T细胞表型和细胞因子检测工作流程为研究者们提供了一套全面的单个细胞水平的 T 细胞研究方法。

1、结合 MHC Tetramer 技术，该系统上可在微流控环境单细胞水平上标记目标 T 细胞，相对于传统的 FACS 检测对细胞活性的损伤，LIGHTNING 上提供了一种快速、温和的进行抗原 特异性的 T 细胞 MHC Tetramer 筛选方法。

2、可以直接检测单个细胞毒 T 细胞表面标志物（CD8+/CD4+/CD137+等）表达水平以及实时分泌的细胞因子（IFN-γ/ TNFα/IL2 等）。

3、可以实时对激活状态的细胞毒 T 细胞进行肿瘤细胞杀伤性试验，从而对 T 细胞的细胞毒活性进行在线评估。

4、提供了一种简化高效的高亲和力和特异性的 T 细胞受体开发流程，仅仅利用 2 天时间即可在线一体化的完成原来 1-3 个月时间里面完成的特异性 T 细胞高效分选（TCR 筛选）及克隆和功能验证试验，帮助研究者们在最短的时间里面找到理想的可有效结合靶抗原的T细胞抗原受体。

5、在免疫基因组学相关的研究方面，该系统可帮助研究者将分析评估后的目的 T 细胞/单个 T 细胞克隆群体选择性的导出用于进行后续的下游测序等实验操作。

总的来说，在 T 细胞修饰及 CAR-T/ TCR-T 等细胞治疗技术的相关应用中， LIGHTNING 以单细胞水平研究的方式帮助研究者们将 T 细胞及其受体的改造后的活性功能分析、培养、克隆等工作流程实时高效的开展完成，以数字细胞学的方式大大的加速了整个细胞免疫治疗研究的进程。

应用举例

LIGHTNING助力 CAR-T，TCR-T 等 T 细胞相关研究转基因 T 细胞靶向治疗肿瘤研究中常见的两种方法是围绕在基因工程 T 细胞中引入 新的 T 细胞受体（TCR）或嵌合抗原受体（CAR）两项。LIGHTNING 实时单细胞免疫学研究系统, 帮助研究者们在单个细胞水平上研究和快速高效的助力 CAR/TCR 载体构建，加速 了 T 细胞基因改造流程。 T 细胞受体改造的 T 细胞过继疗法 TCR-T 在传统的仅增加效应细胞数量的免疫过继治 疗的方法上，是将肿瘤抗原特异性 TCR 基因导入 T 细胞中，从而直接改造 T 细胞结合肿瘤抗原的“接头”TCR，增加效应细胞的特异性使得效应细胞与肿瘤细胞结合的亲和力也大大提高，最终在体外扩增后回输到患者体内进行靶向抗肿瘤治疗的技术。这种通过输注能够识 别特异靶标的基因修饰 T 淋巴细胞，赋予免疫系统以新的自然免疫活性，不仅可以快速杀灭肿瘤，还可以避免传统疫苗和 T 淋巴细胞检查点治疗方法的延迟效应。但目标 TCR 基因治疗的有效率相对较低，研究者们一直把寻找有效的肿瘤靶抗原克隆亲和性的 TCR 受体及 优化 TCR 的转化效率作为研究重点。

LIGHTNING 上的 TCR 开发流程极大的简化并改进了现有复杂繁琐的方法，仅仅利用 2 天时间即可在线一体化的完成原来 1-3 个月时间里面完成的特异性 T 细胞高效分选（TCR 筛选）及克隆和功能验证试验，帮助研究者们在最短的时间里面找到理想的可有效结合靶抗原的 T 细胞抗原受体（TCR Candidates）， 最终直接关联下游测序流程帮助研究者们后直接获得特异性识别肿瘤抗原的 TCR 序列进行 TCR 药物开发或者用于疫苗研究等。 当然不仅仅是 TCR 开发，LIGHTNING 在其他 T 细胞修饰及 CAR-T 细胞治疗技术的相关应用中都以单细胞水平的研究方式帮助研究者们去将 T 细胞及其受体的改造后的活性功能分析、培养、克隆等工作流程实时高效的开展完成，以数字细胞学的方式大大的 加速了整个细胞免疫治疗研究的进程。