导胜单细胞悬液制备技术及其应用

单细胞悬液制备技术在生命科学研究中具有举足轻重的地位，尤其在单细胞测序、原代细胞培养、细胞毒性测试等高要求实验中发挥着至关重要的作用。近年来，随着技术的不断进步，单细胞悬液制备技术也在不断优化，其中导胜公司推出的SoniConvert单细胞悬液制备系统便是其中的佼佼者。本文将详细介绍导胜单细胞悬液制备技术的原理、操作流程、性能优势及其在各个领域的广泛应用。

一、导胜单细胞悬液制备系统的基本原理

SoniConvert单细胞悬液制备系统是一种创新性的仪器，能够快速一键实现从哺乳动物组织或肿瘤组织样本到活单细胞的消融过程。该系统采用微处理器核心控制结合数字化反馈技术，集合控制机械波长传导消融等原理设计。配合导胜生物开发的特异性组织松解剂短暂孵育后（5-15分钟），消融仪可以在3-9秒内将其消融为单细胞悬液。整个制备过程不需要添加研磨材料，如氧化锆磁珠、钢珠等，也不需要专用研磨管（或解离管）和滤网，仅需普通EP管、滤网等通用耗材。该系统可以处理多种样本，包括人或动物的心、肝、脾、肺、肾、脑及对应的原生发肿瘤、骨骼肌、软骨组织等。

二、操作流程
使用SoniConvert单细胞悬液制备系统制备单细胞悬液的操作流程相对简单且高效，具体步骤如下：

1. 样本准备：取适量的组织样本，确保样本新鲜，避免使用冰冻组织。

2. 组织松解剂孵育：将组织样本放入含有特异性组织松解剂的容器中，进行5-15分钟的孵育，使组织蓬松化。

3. 消融处理：将孵育后的组织样本放入SoniConvert系统中，系统会在3-9秒内将其消融为单细胞悬液。

4. 细胞收集与处理：将获得的单细胞悬液通过适当的过滤和离心处理，去除杂质和碎片，得到高质量的单细胞悬液。

三、性能优势

SoniConvert单细胞悬液制备系统具有多项显著的性能优势，使其在单细胞制备领域具有广泛的应用前景：

1. 处理时间短：从组织离体到获得单细胞悬液，整个过程仅需30分钟，大大提高了实验效率。

2. 高单细胞得率：该系统可以从极少量组织（如1/5个穿刺条或1颗类器官）中获取高达数亿个活细胞，细胞活率在80-95%之间。

3. 样品利用率高：针对临床穿刺样本，使样本的利用率可达100%，细胞产量可达10万个以上。

4. 适用范围广：该系统适用于多种类型的组织样本，包括极脆弱组织（如脂肪组织）和极坚韧组织（如皮肤、瘢痕组织）等。

5. 多功能性：除了制备单细胞悬液外，该系统还可以制备具有多能干性的细胞团，用于类器官培养等研究。

四、单细胞悬液制备的其他方法

虽然SoniConvert单细胞悬液制备系统具有显著的优势，但在实际研究中，还需要根据样本类型和实验需求选择合适的制备方法。以下介绍几种常用的单细胞悬液制备方法：

1. 机械法：通过剪切、研磨、吹打等方式将组织块解离成单细胞悬液。这种方法适用于淋巴节、胰腺等免疫器官组织样本。但需要注意的是，机械法可能会对细胞造成一定的损伤，影响细胞活性。

2. 酶解法：使用胰蛋白酶、胶原酶等酶类将组织块消化成单细胞悬液。酶解法适用于非免疫器官组织样本，如胚胎、上皮、肝、肾等组织。酶解时间和酶液配比需要根据组织类型进行优化，以确保获得高质量的单细胞悬液。

3. 密度梯度离心法：适用于外周血单核细胞（PBMC）的制备。通过Ficoll作为密度梯度介质，使不同密度的细胞在对应的界面处分离。这种方法可以获得纯度较高的PBMC，但需要注意操作过程中的细节，如血液样本的保存、离心速度等。

五、单细胞悬液制备的难点与挑战

尽管单细胞悬液制备技术已经取得了显著的进展，但在实际操作中仍面临一些难点和挑战：

1. 细胞活性保持：细胞在解离过程中很容易受到损伤，导致细胞死亡。因此，在制备过程中需要严格控制酶解时间、酶浓度、离心速度等条件，以确保细胞活性的保持。

2. 组织类型差异：不同类型的组织具有不同的解离条件。因此，在实际操作中需要根据组织类型选择合适的解离方法和条件，并进行多次优化以获得最佳效果。

3. 杂质去除：在制备过程中，可能会产生大量的组织碎片和细胞碎片。这些杂质会影响单细胞悬液的质量，甚至导致后续实验的失败。因此，在制备过程中需要采取适当的过滤和离心处理，以去除杂质和碎片。

六、导胜单细胞悬液制备系统的应用

1. 单细胞测序：高质量的单细胞悬液是单细胞测序成功的关键。SoniConvert系统可以快速制备出高活性、无结团、碎片少的单细胞悬液，为单细胞测序提供高质量的样本。

2. 原代细胞培养：原代细胞培养需要高活性的细胞作为起始材料。SoniConvert系统可以从组织样本中快速制备出高活性的单细胞悬液，为原代细胞培养提供可靠的细胞来源。

3. 细胞毒性测试：细胞毒性测试需要高纯度的细胞作为测试对象。SoniConvert系统可以制备出纯度较高的单细胞悬液，为细胞毒性测试提供准确的测试结果。

4. 类器官培养：类器官培养需要具有多能干性的细胞团作为起始材料。SoniConvert系统不仅可以制备单细胞悬液，还可以制备具有多能干性的细胞团，为类器官培养提供理想的细胞来源。

导胜SoniConvert单细胞悬液制备系统作为一种创新性的仪器，具有显著的性能优势和广泛的应用前景。该系统可以快速、高效地制备出高质量的单细胞悬液，为单细胞测序、原代细胞培养、细胞毒性测试等高要求实验提供可靠的样本来源。同时，该系统还具有操作简便、适用范围广等优点，使得单细胞悬液制备技术更加便捷和高效。未来，随着技术的不断进步和应用领域的不断拓展，导胜SoniConvert单细胞悬液制备系统将在生命科学研究中发挥更加重要的作用。